本次《生化奇兵2》浮出水面，新增了多人对战功能，让玩家在体验深海旅程的同时，也能与好友在线同乐。游戏的多人模式设有等级系统，通过击杀敌人、协助队友、拍照、入侵炮塔或贩卖机等行为获取亚当，累积亚当即可升级，并解锁新武器与能力。
除提供额外经验值的试炼外，多人游戏的解锁项目主要分为三类：武器（右手）、Plasmid（左手）与Gene Tonics（常驻效果）。每种武器均可附加一项升级，提升枪械的威力、射速或装弹量。
武器升级详情
手枪为起始武器，5级解锁全自动发射模式（射速降低），27级解锁威力升级（射速降低）。霰弹枪同为起始武器，9级提升射速（射程降低），29级实现自动装填（射速降低）。
机枪2级解锁，13级弹匣扩容33%（30发增至40发），31级降低后座力（射速降低）。榴弹发射器6级解锁，17级变更为追热火箭（爆炸范围缩小），33级大幅提升弹速。
十字弓10级解锁，21级威力提升（射速大幅降低），35级射速提升（威力大幅降低）。钉枪14级解锁，23级加长弹匣，37级威力增加（准度降低）。猎象枪18级解锁，25级加装狙击镜（远程准度提升但近视野受限），39级威力增加（射速降低）。
Plasmid能力解析
Incinerate：初始自带，火焰攻击造成持续伤害，可引燃油洼、融冰，蓄力提升威力与范围。Winter Blast：初始自带，冷冻攻击降低敌人移速与攻速，蓄力增强缓速效果，可灭火，肉搏或Aero Dash可粉碎冰冻敌人。
Electro Bolt：初始自带，闪电攻击瘫痪敌人移动与武器（仍可使用Plasmid），射击水洼引发范围导电，蓄力提升威力与瘫痪时间。Aero Dash：4级解锁，向面朝方向高速冲刺并撞倒敌人，撞击冰冻敌人可将其粉碎。
Geyser Trap：8级解锁，设置陷阱将敌人或使用者弹飞，可与Electro Bolt或Winter Blast组合制造瘫痪/冰冻陷阱。Telekinesis：12级解锁，以念动力移动物体，效果同单人模式。
Houdini Plasmid：16级解锁，隐身状态，攻击或使用Plasmid会现形，持续消耗EVE。Insect Swarm：20级解锁，造成持续伤害并扰乱敌人视线。
Gene Tonics常驻效果
3级：Master Researcher（加快研究尸体速度）、Security Evasion（降低敌方炮塔准度）。7级：Speedy Recovery（加快回血）、EVE Saver（减少Plasmid消耗）。11级：Back Stabber（背击肉搏额外伤害）。
15级：Metabolic EVE。19级：Sabotage。22级：Repairman。24级：Speedy Hacker。26级：Slugger。28级：Leg Up。30级：Fast Feet。32级：Deadly Machines。
34级：Head Hunter（爆头伤害增加）。36级：Big Game Hunter。38级：Death Trap。40级：Resurrection（倒地后以极低血量复活一次）。